Potencial acaricida do extrato de folhas de
Xylopia emarginata
Mart. contra larvas de
Rhipicephalus microplus
Juliana Pimenta Cruz
1
*; Viviane de Oliveira Vasconcelos
2
; Patrícia Conceição Medeiros
3
; João Carlos Figueire- do
4
; Yule Roberta
Ferreira Nunes
5
; Eduardo Robson Duarte
6
; Ana Paula Venuto
7
DOI: https://doi.org/10.35699/2447-6218.2021.34636
Resumo
O objetivo desse trabalho foi avaliar a ação carrapaticida in vitro do extrato etanólico (EE) de folhas de Xylopia emarginata
Mart. com diferentes teores de taninos sobre larvas de R. microplus. Para isso, as folhas de X. emarginata foram coletas
mensalmente durante o período de 12 meses para avaliar a produção de taninos através da técnica de solvólise catalisada por
butanol/HCl. Para avaliar a eficácia do EE, foi realizado o teste do pacote de larvas (TPL) com leitura no intervalo de 24 horas
de incubação utilizando as concentrações de 25 a 100 mg mL-1, o controle negativo contendo água destilada e o controle
positivo contendo carrapaticida químico. Observou-se que o EE contendo 5,9% de teor de taninos promoveu 80,44% de
mortalidade na concentração de 100 mg mL-1. O EE contendo 13,2% de teor de taninos promoveu 97,43% de mortalidade a 100
mg mL-1. Dessa forma, constatou-se alta atividade larvicida dos extratos etanólicos de folhas de X. emarginata sobre larvas de
R. microplus e essa atividade pode estar relacionada aos teores de taninos.
Palavras-chave:
Annonaceae. Carrapato bovino. Fitoterapia. Taninos.
Acaricide potential of
Xylopia
emarginata Mart. leaf extract against
Rhipicephalus
microplus
larvae
Abstract
The objective of this work was to evaluate the in vitro carrapaticidal action of ethanol extract (EE) of Xylopia emarginata
leaves
Mart.com different tannin contents on R. microplus larvae. For this, as leaves of X. emarginata were collected monthly during
the period of 12 months to evaluate the production of tannins through the solveylysis technique catalyzed by butanol/HCl. To
evaluate the efficacy of EE, the larvae bundle test (TPL) was performed with reading in the interval of 24 hours of incubation
using concentrations of 25 to 100 mg mL-1, the negative control containing
distilled water and the positive control containing
chemical carrapaticide. It was observed that the EE containing 5.9%
tannin content promoted 80.44% mortality at the
concentration of 100 mg mL-1. The EE containing 13.2% tannin
1Universidade Estadual de Montes Claros. Montes Claros, MG. Brasil.
https://orcid.org/0000-0001-5115-3136
2Universidade Estadual de Montes Claros. Montes Claros, MG. Brasil.
https://orcid.org/0000-0001-5126-3124
3Instituto Federal de Minas Gerais. Januária, MG. Brasil.
https://orcid.org/0000-0002-2949-3940
4Universidade Estadual de Montes Claros. Montes Claros, MG. Brasil.
https://orcid.org/0000-0001-6453-8684
5Universidade Estadual de Montes Claros. Montes Claros, MG. Brasil.
https://orcid.org/0000-0003-3328-7506
6Universidade Federal de Minas Gerais. Montes Claros, MG. Brasil.
https://orcid.org/0000-0002-2205-9412
7Universidade Estadual de Montes Claros. Montes Claros, MG. Brasil.
https://orcid.org/0000-0002-3103-7063
*Autor para correspondência: JulianaPimenta97@outlook.com
Recebido para publicação em 25 de Junho de 2021. Aceito para publicação 30 de Junho de 2021
e-ISSN: 2447-6218 /
ISSN: 2447-6218. Atribuição CC BY.
CADERNO DE CIÊNCIAS AGRÁRIAS
Agrarian Sciences Journal
2
Cruz, J. P. et al.
content promoted 97.43% mortality at 100 mg mL-1. Thus, high larvicidal activity of ethanol extracts of leaves of X.
emarginata on Larvae of R. microplus was verified and this activity may be related to tannin contents.
Keywords:
Annonaceae. Bovine tick. Phytotherapy. Tannins.
Introdução
O Rhipicephalus microplus representa um dos
ectoparasitas mais importantes para a bovinocultura. Esse
carrapato é responsável por elevadas perdas eco- nômicas
na cadeia produtora de leite, carne e couro,
podendo
ocasionar o óbito (Roy et al., 2017). Além disso,
as
hemoparasitoses transmitidas por esse vetor compõe
um
complexo de enfermidades de importância em saúde pública
como a babesiose humana (Hajdulek et al., 2013).
foram coletadas mensalmente no período de junho e
setembro de 2018. As exsicatas foram depositadas no
Herbário Montes Claros, voucher 6774 e a espécie foi
identificada considerando as caracteristicas descritas em
Lorenzi (1992).
As folhas foram selecionadas e foram descartadas
aquelas com deteriorações. O material foi desidratado em
estufa a 40°C por 72 horas, e trituradas com o auxílio de um
triturador (Di Grano MDR - 302, Marca, estado, pais). O pó
foi armazenado em temperatura ambiente e em sacos de
papel para evitar incidência de luz.
O principal método de controle desse parasito é
o
químico. Entretanto, o uso indiscrimidado dos produtos
carrapaticidas tem favorecido a resistência, inviabilizan- do
assim o controle efetivo, com aumento de risco de
contaminação ambiental e os produtos finais de origem
animal como carne e leite (Guerrero et al., 2012). A busca
por
métodos de controle alternativos para o carrapato é uma
estratégia fundamental para a criação de bovinos em
condições tropicais (Webster et al., 2015).
O extrato etanólico (EE) foi obtido por meio da
submersão de 100g de material vegetal em 1000 mL de
etanol PA (álcool etílico), em recipientes de vidro âmbar,
conservados em local escuro e por sete dias. Os extratos
foram filtrados em funil,com gaze e algodão e levados à
estufa de circulação forçada de ar a 40°C, até a obtenção de
peso constante (Nery et al., 2010). Os extratos secos foram
removidos e armazenados em frascos escuros e as
subalíquotas foram submetidas ao determinador de matéria
seca (Association of Official Analytical Chemists
- AOAC, 1990) (mg mL-1) a 105°C para cálculo das con-
centrações avaliadas.
Muitos metabólitos secundários de plantas têm
sido
utilizados no controle alternativo para minimizar os
impactos
causados pelos produtos químicos (Wiesbrook, 2004). O
bioma Cerrado possui ampla diversidade de flora contendo
compostos e moléculas importantes com principio ativos que
podem ser utilizados no controle de ectoparasitos (Bahia et
al., 2009). A família Annonaceae
é abundante nesse bioma. O
gênero Xylopia, pertencente
a essa familia (Marimon-Junior e
Haridasan, 2005) é
reconhecido por apresentar propriedades
antimicrobiana, acaricida, inseticida e nematicida (Konning et
al., 2004),
entretanto ainda não é conhecida sua atividade
contra carrapatos. Uma das espécies identificadas no Brasil
é
Xylopia emarginata Mart. conhecida como “pindaíba-reta”,
que pode ser encontrada em lugares brejosos e em ma- tas
ciliares, principalmente nos estados da Bahia, Minas Gerais,
Goiás, Mato Grosso do Sul e São Paulo (Lorenzi, 1992).
A deteminação dos teores totais de taninos con-
densados (proantocianidinas) foi avaliada ao longo do
período amostral, de acordo com Medeiros et al. (2019),
após
solvólise catalisada por ácido com n-BuOH/HCl 37%
(95:5),
seguindo metodologia descrita por Hiermann et
al. (1986).
Constatou-se que o EE de folhas coletadas em
junho e
setembro apresentaram 13,2% e 5,9% de teores de taninos
condensados, respectivamente (Medeiros et al., 2019).
Eficácia dos extratos contra larvas de
R. microplus
:
teste do
pacote de larvas (TPL)
Neste estudo, o objetivo foi avaliar o efeito car-
rapaticida in vitro do extrato etanólico das folhas de Xy- lopia
emargianata contendo diferentes teores de taninos
condensados contra larvas de Rhipicephalus microplus.
Para o experimento, foram utilizadas larvas de 15 a 28
dias pós-eclosão, provenientes de infestação natural
em
bovinos provenientes de uma propriedade rural de
Bocaiúva-MG. Esses animais não tiveram contato com
carrapaticida por aproximadamente 30 dias.
Material e métódos
Obtenção dos extratos etanólicos
Os extratos foram avaliados nas concentrações 25,
50, 75 e 100 mg mL-1. Como controle negativo foi utilizado
água purificada e a solução de Cipermetrina a 0,025 mg
mL-1 (Butox MSD Saúde Animal, São Paulo Brasil) como
controle positivo. Os procedimentos foram realizados em
quatro repetições.
O material vegetal foi composto por folhas de X.
emarginata coletadas no município de Bonito de Minas, no
norte de Minas Gerais, na vereda Almescla (coorde- nadas
45°95’W,15°88’Se43°95’W,14°40”S). As amostras
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3
Potencial acaricida do extrato de folhas de
Xylopia emarginata
Mart. contra larvas de
Rhipicephalus microplus
Os testes foram realizados de acordo com Stone e
Haydock (1962), inserindo-se aproximadamente 50 larvas
em
pacotes confeccionados de papel filtro (Whatmann no1) de
6 x 6 cm para cada repetição. Posteriormente, os pacotes
foram vedados com grampos e impregnados pelas soluções.
Cada grupo de repetições foi depositado
em placas de Petri. As
larvas incubadas foram acondicionas
em estufa a 28°C e
aproximadamente 70% de umidade
relativa por 24 horas.
Após esse período os pacotes foram
abertos sobre uma
superfície branca, e as larvas vivas e mortas foram
quantificadas.
com 5% de significância em delineamento inteiramente
casualizado. As concentrações letais para matar 90% de
larvas (CL90) foram estimadas pela análise de regressão
probit do pacote estatístico Saeg 9.1.
Resultados e discussão
Os resultados consistem na primeira verificação
da
atividade acaricidade de EE de folhas de X. emarginata
frente a
larvas de R. microplus. O EE extraído de folhas coletadas
durante o mês de setembro (5,9% de teor de taninos)
promoveu 80,44% de mortalidade larval na concentração
100 mg mL-1 (p≤0,05) (Tabela 1). A CL90 para esse extrato
foi de 44,08 mg mL-1 (Figura 1a). O EE extraído de folhas
coletadas do mês de junho (13,2% de teor de taninos
condensados) promoveu taxas de morta-
lidade larval entre
96,43 a 97,43% nas concentrações de 75 e 100 mg mL
-1
respectivamente e que foram superiores
ao controle contendo
água destilada (p≤0,05) (Tabela
1). ACL90 para esse extrato
foi de 41,54 mg mL
-1
(Figura
1 b).
Análises estatísticas
O estudo foi realizado em delineamento intei-
ramente casualisado comparando-se com o controle ne-
gativo contendo água e o controle positivo contendo
cipermetrina.
O número relativo de larvas mortas sobre o nú-
mero total de larvas foi utilizado para análise de variân- cia e
as médias comparadas pelo teste de Scott-Knott
Tabela 1 –
Mortalidade larval de Rhipicephalus microplus tratados com extrato etanólico de folhas de Xylopia emarginata
com 5,9% e 13,2% deteor de taninos condensados.
Tratamentos
Taninos condensados
Taninos condensados
(mg mL-1)
100
75
50
25
Água estéril
Cipermetrina*
CV(%)**
(5,9%)
80,44 Bb
77,28 Bb
74,23 Ba
7,97 Cb
0 Da
100 Aa
15
(13,2%)
97,43 Aa
96,43 Aa
75,49 Ba
51,24 Ca
0 Da
100 Aa
10
* Cipermetrina 0,025 mg /mL (ButoxMSD Saúde Animal, São Paulo Brasil).
**Coeficiente de variação (%)
Letras maiúsculas distintas indicam diferença significativa (p < 0,05) entre os tratamentos e minúsculas indicam diferença significativa (p < 0,05) entre as
diferentes concentrações de tanino, por teste de Scott-Knott a 5%.
Ao analisar a eficácia entre os diferentes extratos
em
relação aos teores de taninos, observou-se diferença
significativa nas concentrações de 100, 75 e 25 mg mL-1 dos
extratos contenho 13,2% de teor de tanino, sendo
estatisticamente superior a eficácia dos extratos com 5,9%
de teor de taninos.
Segundo Fernández -Salas (2011), extratos eta-
nólicos de plantas ricas em tanino como Acacia pennatula,
Piscidia piscipula, Leucaena aleucocephala e Lysiloma latisi-
liquum representam alternativa promissora para o controle
de R.
microplus. Entretanto, Vasconcelos et al. (2018)
observaram que presença de níveis baixos de taninos
em
extratos etanólicos de Ximenia americana, Piptadenia
viridiflora e Schinopsis brasiliensis também promoveram
eficácia acaricida contra teleóginas de Dermacentor nitens
nas
concentrações de 100 e 150 mg mL-1, indicando que outros
metabólitos tambem poderiam participar com o efeito
acaricida.
Sabe- se que os taninos condensados são impor-
tantes no controle de parasitos pois essas substâncias são
classificadas como redutores digestivos, com efeito
proporcional à concentração (Monteiro et al., 2011).
Reduzem significativamente o crescimento e a sobre-
vivência de artrópodes, uma vez que inativam enzimas
digestivas e criam um complexo de taninos-proteínas de
difícil digestão (Mello e Silva-Filho, 2002).
O potencial acaricida de Annonacea pôde ser
comprovado em estudo de Broglio-Micheletti (2009), que
avaliou o extrato etanólico das sementes de Annona
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Cruz, J. P. et al.
muricata na concentração de 2% verificando 100% de
eficácia para mortalidade de teleóginas de R. microplus. O
extrato aquoso da casca do fruto de Annona squamosa
apresentou atividade larvicida contra R. microplus, sendo
observadas mortalidades de 92 e 100% nas concentrações
de
1.500 e 2.000 ppm, respectivamente (Madhumitha et al.,
2012).
Figura 1 – Porcentagerm de sobrevivência de larvas de Riphicephalus microplus em função da concentração do extrato etanólico
de folhas de Xylopia emarginata com 5,9% (a) e 13,2% (b) de teor de tanino.
Catto et al. (2009), observou em estudo, ativi-
dade
acaricida elevada dos extratos etanólicos da raiz de
Anonna
dioica, que apresentou efeito acaricida de 95% e
98,7% nas
concentrações de 5% e 20%. Além disso, óleos
essenciais
obtidos a partir de frutos e folhas de Xylopia sericea
demonstraram atividade acaricida sobre larvas de
Tetranychus urticae com eficácia de 95% a 10 mg/mL
(Pontes et al., 2007).
integrado de R. microplus, aumentando a possibilidade de obter
produtos naturais como alternativas aos acaricidas
sintéticos.
Futuros estudos devem ser conduzidos com o
objetivo de
testar o extrato em fêmeas ingurgitadas, bem
como identificar
os componentes acaricidas presentes que possam ser
utilizados em programa de controle de carrapatos. Além
disso, devem ser avaliada também a influência do teor de
taninos na mortalidade de fêmeas
adultas de R. microplus
para elucidar a sua influência em
diferentes fases de
crescimento dessa espécie.
Deste modo, a espécie X. emarginata pode ser in-
cluída como potencial candidata no programa de controle
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Potencial acaricida do extrato de folhas de
Xylopia emarginata
Mart. contra larvas de
Rhipicephalus microplus
Conclusão
Esta pesquisa foi financiada pelo Programa de
Pesquisa Ecológica de Longa Duração (PELD-VERE) do
Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e
Tecnológico (CNPq 441440/2016-9; 441583/2020-2;
308877/2019-5), Coordenação de Aperfeiçoamento de
Pessoal de Nível Superior (CAPES 88887.136273/2017- 00),
Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Mi- nas
Gerais (FAPEMIG APQ-04816-17; APQ-02983-17;
CRA-PPM-00539-18), Ministério da Ciência, Tecnologia e
Inovações, Programa de pós graduação em botânica
aplicada (PPGBOT-Unimontes).
Os extratos etanólicos obtidos de folhas de Xylo-
pia
emarginata apresentam potencial para o controle de larvas
de Rhipicephalus microplus, sendo que, o extrato com maior
teor de teor de tanino apresentou eficácia mais elevada no
controle dessas larvas.
Agradecimentos
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