TY - JOUR AU - Cangussu, Carlos Humberto Chamone AU - Cardoso, Léia AU - Xavier, Alessandra Rejane Ericsson de Oliveira AU - Santos, Josiane dos AU - Campos, Luiz Felipe Lopes AU - Brandão, Murilo Malveira AU - Garcia, Denys Cunha Fonseca AU - Oliveira, Alexandre Moisés Ericsson de AU - Rossi, Evandrei Santos AU - Xavier, Mauro Aparecido de Sousa PY - 2020/05/02 Y2 - 2024/03/29 TI - Padronização de método baseado em PCR e sequenciamento para detecção da presença do gene CP4 EPSPS em Zea mays JF - Caderno de Ciências Agrárias JA - Cad. Cienc. Agrar. VL - 12 IS - 0 SE - ARTIGOS ORIGINAIS DO - 10.35699/2447-6218.2020.19990 UR - https://periodicos.ufmg.br/index.php/ccaufmg/article/view/19990 SP - 1-9 AB - <p>O plantio de cultivares transgênicas no Brasil e no mundo tem crescido e demandado regulamentação legal. O evento transgênico MON8807 é frequentemente encontrado em cultivares de milho comercializadas no Brasil. Esse evento contém em sua construção os genes <em>CP4 EPSPS</em> e <em>Cry3Bb1 </em>que codificam, respectivamente, a tolerância ao herbicida glifosato e resistência a lagartas.&nbsp; Metodologias que permitam o rastreamento de eventos transgênicos são globalmente mandatórias. O objetivo deste trabalho foi padronizar uma metodologia baseada em PCR qualitativo e sequenciamento para detecção do gene <em>CP4 EPSPS</em> em <em>Zea mays</em>. Para tal linhagens comerciais de milho transgênico contendo o evento MON88017 e milho convencional foram submetidas ao procedimento de extração de DNA. Foram desenhados oligonucleotídeos para detecção parcial dos genes zeína e <em>CP4 EPSPS</em>. A reação de PCR para detecção das regiões parciais dos genes <em>CP4 EPSPS</em> e <em>Zeína</em> (como marcador endógeno da espécie <em>Z. mays</em>) foi então realizada. As três linhagens transgênicas de milho testaram positivo para os gene <em>Zeína </em>e <em>CP4 EPSPS</em>, bem como as duas linhagens convencionais testaram negativo para <em>CP4 EPSPS</em> e positivas somente para o gene zeína. A confirmação da presença das regiões gênicas, os produtos de PCR foram sequenciados e apresentaram 100% de identidade com sequência dos genes <em>Zeína </em>e <em>CP4 EPSPS</em> depositados no <em>GenBank</em>. Os resultados deste trabalho sugerem a aplicabilidade de um método “<em>in house</em>” para detecção qualitativa do gene <em>CP4 EPSPS</em> em cultivares de milho geneticamente modificado.</p> ER -