Padronização de método baseado em PCR e sequenciamento para detecção da presença do gene CP4 EPSPS em Zea mays

Palavras-chave: Organismos geneticamente modificados, MON8807, Detecção, Milho

Resumo

O plantio de cultivares transgênicas no Brasil e no mundo tem crescido e demandado regulamentação legal. O evento transgênico MON8807 é frequentemente encontrado em cultivares de milho comercializadas no Brasil. Esse evento contém em sua construção os genes CP4 EPSPS e Cry3Bb1 que codificam, respectivamente, a tolerância ao herbicida glifosato e resistência a lagartas.  Metodologias que permitam o rastreamento de eventos transgênicos são globalmente mandatórias. O objetivo deste trabalho foi padronizar uma metodologia baseada em PCR qualitativo e sequenciamento para detecção do gene CP4 EPSPS em Zea mays. Para tal linhagens comerciais de milho transgênico contendo o evento MON88017 e milho convencional foram submetidas ao procedimento de extração de DNA. Foram desenhados oligonucleotídeos para detecção parcial dos genes zeína e CP4 EPSPS. A reação de PCR para detecção das regiões parciais dos genes CP4 EPSPS e Zeína (como marcador endógeno da espécie Z. mays) foi então realizada. As três linhagens transgênicas de milho testaram positivo para os gene Zeína e CP4 EPSPS, bem como as duas linhagens convencionais testaram negativo para CP4 EPSPS e positivas somente para o gene zeína. A confirmação da presença das regiões gênicas, os produtos de PCR foram sequenciados e apresentaram 100% de identidade com sequência dos genes Zeína e CP4 EPSPS depositados no GenBank. Os resultados deste trabalho sugerem a aplicabilidade de um método “in house” para detecção qualitativa do gene CP4 EPSPS em cultivares de milho geneticamente modificado.

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Biografia do Autor

Alessandra Rejane Ericsson de Oliveira Xavier, Universidade Estadual de Montes Claros. Montes Claros,MG. Brasil.

Possui graduação em Ciências Biológicas pela Universidade Estadual de Goiás (1996), doutorado em Ciências Biológicas (ênfase em Biologia Molecular) pela Universidade de Brasília (2006) e pós- doutorado em Ciências Agrárias pela Universidade Federal de Minas Gerais (2015). Como bióloga atuou no Controle de Qualidade Microbiológico da Novo Nordisk Produção Farmacêutica do Brasil. Tem experiência na área de Microbiologia, com ênfase em Microbiologia Aplicada à Indústria Farmacêutica, atuando principalmente nos seguintes temas: Validação de métodos analíticos microbiológicos, Escrita de procedimentos operacionais, Ministração de treinamentos em métodos analíticos microbiológicos, Qualificação de equipamentos de laboratório e Identificação de Micro-organismos por métodos tradicionais e rápidos. Possui experiência em docência no ensino superior (em metodologias tradicionais e ativas dentre as quais aprendizagem baseada em problemas), atuando principalmente em ensino e pesquisa nas áreas de Microbiologia e Biologia Molecular ou a ela relacionadas. Já foi membro do comitê de validação na Novo Nordisk, bem como diretora de pesquisa e membro do comitê de ética em pesquisa nas Faculdades Unidas do Norte de Minas. Desde 2007 atua como docente do curso de graduação em Medicina na Universidade Estadual de Montes Claros.A partir de 2011 tornou-se membro do corpo docente permanente do Mestrado Profissional em Biotecnologia da Universidade Estadual de Montes Claros onde além de orientar estudantes participa como professora das disciplinas: Biologia Molecular, Microbiologia Industrial, Qualidade no Segmento Biotecnógico e Tecnologia de Produção de Proteínas Recombinantes. Coordenadora do laboratório de ensino de MIcrobiologia - Unimontes

 

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Publicado
2020-05-02
Como Citar
Cangussu, C. H. C., Cardoso, L., Xavier, A. R. E. de O., Santos, J. dos, Campos, L. F. L., Brandão, M. M., Garcia, D. C. F., Oliveira, A. M. E. de, Rossi, E. S., & Xavier, M. A. de S. (2020). Padronização de método baseado em PCR e sequenciamento para detecção da presença do gene CP4 EPSPS em Zea mays. Caderno De Ciências Agrárias, 12, 1-9. https://doi.org/10.35699/2447-6218.2020.19990
Seção
ARTIGOS ORIGINAIS

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